传统与光谱流式共舞高效便捷完成多色实验!
流式细胞术作为细胞分析的核心技术,已发展了几十年,从单色荧光检测的早期阶段到如今的光谱流式技术,它经历了快速的技术演进。然而,这并不代表一种技术能够完全取代另一种技术。实际上,
传统流式细胞术和光谱流式细胞术并不是相互竞争的技术,而是解决流式细胞术中不同问题的两种有效方式。
在流式细胞术中,荧光信号的检验测试能力是评估技术优劣的一个重要标准。然而传统流式与光谱流式虽然检测硬件类似,但是对于荧光素的识别使用了两种不同的思路。
但是,当实验需要同时检测二十几,甚至更多的荧光标记时,传统流式会面临严重的光谱重叠和补偿难度,导致分辨能力下降。
光谱流式通过采集完整光谱并用光谱拆分,可在高参数、多色实验中依然保持良好的信号分辨能力。
标准化涉及方案优化与样本制备、流式细胞仪的硬件调试、数据处理等多个环节,任何环节的差异都可能会影响实验结果的可靠性。
传统流式细胞术在标准化方面已有成熟的流程,操作简单便捷且易于复制。而光谱流式由于光谱流式涉及到非常多的荧光信号检测器,所以标准化的难度更高。尤其是在样本制备过程中,样本的处理和染料选择要进一步优化,以确保正确的光谱拆分和数据准确性。
传统流式细胞术在信号灵敏度、标准化、样本制备等方面具有天然优势,适合许多成熟应用,尤其是在临床和生物制药相关的高通量筛选中。
研究者们能够准确的通过实验需求,选择最合适的技术工具,充分的发挥传统流式和光谱流式各自的优势,从而取得更加准确、全面的研究成果。
在流式细胞术的世界中,spread现象犹如潜伏的暗流,悄然影响着数据的精度。
有些研究者认为,spread这一现象仅在传统流式细胞术的荧光补偿过程中出现。实际上,在光谱流式细胞术中,spread现象同样存在。尽管两者都会影响数据分析的精度,但其产生原因和应对策略各有不同。
,能够有效地提高光谱流式细胞术的分析精度和数据质量。在追求精准数据的光谱流式细胞术时代,CytoFLEX mosaic 仪器独特地配备了两种不同的光谱拆分算法:既有经典成熟的最小二乘法 (LSM) ,又有先进且精准的泊松混合算法,“双剑合璧”,
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